Микки-Маус появился как срочная замена успешного мультипликационного персонажа Освальда, авторские права на которого Уолт Дисней по ошибке передал компании Universal Pictures. Освальд был очеловеченным кроликом, а за основу образа Микки-Мауса была взята мышь.
Впервые Микки-Маус появился в немом мультфильме «Безумный самолёт» 15 мая 1928 года.
А первым звуковым мультфильмом с этим героем был «Пароходик Вилли», представленный 18 ноября того же года.
В этих мультиках Микки ещё без привычных белых перчаток — они появятся после выхода мультфильма «Деревенская опера» в 1929 году.
Не во всех мультиках Микки оставался антропоморфным персонажем. В мультике «Алисе не повезло с мышами» (1929) Микки был в роли обычной мыши, которая убегала от зловредного кота, похожего на Тома, придуманного в 1940-м Уильямом Ханной для «Тома и Джерри».
В 1939 году Микки-Маус опять изменился: аниматор Фред Мур вместо двух огромных чёрных глаз начал рисовать глаза с чёрным зрачком посередине.
Первые комиксы с Микки-Маусом появились в 1930-м. Рисунки для них делал Флойд Готтфредсон.
Сначала Уолт Дисней сам озвучивал Микки-Мауса, но в 1947 году студия была вынуждена пригласить на эту роль актёра Джимми Макдональдав, так как голос мультипликатора из-за курения стал хриплым, появился кашель. С 1997-го по 2009-й годы Микки-Мауса озвучивал Уэйн Оллвайн.
В 1940 году Микки-Маус появляется в своём первом полнометражном мультфильме «Фантазия». В годы войны Дисней занимался создание пропагандистских фильмов, что не лучшим образом отразилось на рейтингах весёлого мышонка. Он вернулся на экраны в 1950-х уже в качестве персонажа для детских передач и телевизионных телешоу.
В 1983 году Микки-Маус снова появился в «Рождественской истории» — адаптации «Рождественской песни» Чарльза Диккенса, — а в 1988 году в знаменитом фильме Роберта Земекиса «Кто подставил Кролика Роджера».